流式細胞術(Flow Cytometry,FCM)是在流式細胞儀的基礎上,對處于快速直線流動狀態的單列細胞或生物顆粒進行逐個、多參數、快速定性、定量分析的一種高新技術,具有高通量、多參數、速度快,采集數據量大、操作靈活等優點。最開始檢測單細胞內DNA、RNA含量,蛋白質或線粒體等大分子結構和細胞動力學,到如今拓展到細胞表面標志及抗原決定簇的研究、細胞抗原表達、免疫功能測定、細胞分選和鑒定、基因表達蛋白檢測、細胞內細胞因子鑒定等多個研究領域,在市場上應用極為廣泛。
流式細胞儀(flow cytometer,FCM)是以流式細胞術為核心技術,集光學、電子學、流體力學、細胞化學、生物學、免疫學以及激光和計算機等多門學科和技術于一體的先進科學技術設備。是現代科學研究中的先進儀器之一,被譽為實驗室的”CT”。流式細胞儀主要由液流系統、光路系統、檢測分析系統三部分組成。部分儀器在電子系統中具有分選功能,通過對粒子進行充電和偏轉,達到對細胞的分選并分析的目的。
流式細胞術原理
利用流式細胞術快速精確的對單個細胞的理化性質進行定量分析和分選,主要通過幾個步驟:制備單細胞懸液,用特異性熒光染料標記的抗體進行染色,經染色后的待測細胞在一定氣體壓力下被壓入流動室,在鞘液的包裹下細胞呈單行排列,依次通過檢測區域,在激光束的照射下細胞會產生散射光和激發熒光。這兩種信號會同時被光電倍增管( PMT) 接收。接收后可轉換為電信號,通過模/數轉換器,將連續的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號,進行分析。