1、開始運行儀器

打開熒光定量PCR儀底座開關，再打開定量PCR儀檢測器開關。實驗前先讓系統預熱30分鐘，打開電腦，啟動iQ5軟件。

2、放置樣品

   將PCR反應體系加入到0.2ml的薄壁管或96孔板中，蓋上管蓋。注意，必須帶一次性塑料手套，不要讓手指接觸到反應管表面。將反應管按順序放入儀器的加熱孔中。

3、設置程序，運行實驗定量PCR軟件操作基本步驟為：

a.設置熱循環程序文件（Protocolfile）
b.設置反應板文件（PlateSetupfile）
c.點擊“Run”鍵,運行程序
d.數據分析

4、熒光定量PCR儀測量結果分析

①PCR反應結束后，軟件會自動計算標準曲線和Ct值等。

②如需進行表達量分析、等位基因分析等，在軟件窗口選擇相應分析功能。

③點擊右上方的“Report”鍵，還可輸出結果報告單

5、關閉運行儀器

     實驗結束后關閉iQ5軟件、熒光定量檢測器及擴增系統電源，關閉電腦，取出反應管。