解析Eppendorf5424R離心機的多種類型
Eppendorf5424R離心機的分離技術是根據顆粒在一個實用離心場合中的狀態而發展起來的新技術。不同密度、大小或形狀的顆粒在不同速度的離心場合中沉降,所以一個大體是球形非均一的混合物,可以用離心的方法加以分離,是為了進一步研究生物化學、分離大量的物質。例如收集細胞、分離血漿,從這些預純化的制劑中分離DNA和蛋白質分子,并可分離出病毒以及大規模大腸桿菌、嚴細胞成份、核蛋白微粒等。
離心機都可以配置不同大小的離心管,只要改變轉子或者使用不同的/適配器相配的轉子。轉子是離心機用于分離試樣的核心部件,轉子規格、品種的多少是衡量離心機生產技術掌握程度的重要標志,轉子一般可分為下列五大類:
1.固定角轉子:
主要用于分離沉降速度有明顯差異的顆粒樣品。顆粒在扇形溶地移動的距離很短,碰到外壁的顆粒沿著管壁滑到管底,形成沉淀,因此這種轉子能很快地收集沉淀物。分離過程中,由于管壁的作用,在離心管內將會引起強烈的對流,對具有相同沉降速率的顆粒會產生不良影響。
2.甩平轉子:
主要用于樣品作密度梯度離心。顆粒移動距離長,溶液中的組分相對于管壁的位置在離心過程中和離心后不發生改變,因此離心效果好,但因顆粒在離心場中是從旋轉中沿徑向散離出去,而不是按相互平行的路線沉降。顆粒碰到外壁沿著管壁滑到管底,因此也會產生對流。
3.連續離心轉子:
主要用于懸浮介質中高速分離較小的顆粒物質,利用離心淘析技術對整細胞或大的亞細胞粒子進行分離,在無菌和低溫條件下,被分離的組分,能保持活性,回收率高等優點。如果液流方向與離心力方向相反,即降低了粒子運行速度,相當于增長了運行距離,從而提高了分辨能力。
4.區帶轉子:
主要用于大容量的密度梯度離心,當實驗所需制備的樣品量多,而甩平轉子因受到量的限制時,采用區帶離心是較好的。區帶轉子避免了用離心管所引起的壁效應和干擾,提高了分辨率。
5.垂直轉子:
主要用于樣品在短時間作密度梯度離心。甩平轉子分離粒子位移距離長,分辨能力高,分離后組分的區帶較寬,便于回收,但所需時間長,垂直轉子分離的粒子位移距離等于離心管直徑。轉子轉動前,管內密度梯度溶液的密度是沿重力方向變化,轉動后,溶液的密度逐漸改變為離心力方向(水平方向)變化,離心結束后,溶液的密度變化方向因重力作用又沿鉛垂方向變化,形成鉛垂方向的密度梯度,由于離心管是垂直放置,所以溶液粒子位移的距離等于離心管的直徑。離心時間短,離心后樣品組分的區帶較寬,但因離心時間短,粒子得不到充分分離,將會失去一些組分,又因區帶與梯度介質的接觸面大,易于擴散,停機后密度重新定向,易于混合,所以作區帶離心的效果,垂直轉子不于甩平轉子。